進(jìn)口熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
進(jìn)口熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。
進(jìn)口熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:1.照明方式通常為落射式,即光源通過(guò)物鏡投射于樣品上;2.光源為紫外光,波長(zhǎng)較短,分辨力高于普通顯微鏡;3.有兩個(gè)特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見(jiàn)光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護(hù)人目。
進(jìn)口熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求
(一)載玻片載玻片厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。
?。ǘ┥w玻片蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過(guò),而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。
?。ㄈ?biāo)本組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重迭或雜質(zhì)掩蓋,影響判定。
(四)封裱劑封裱劑常用甘油,必須無(wú)自發(fā)熒光,無(wú)色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時(shí)較亮,不易很快褪往。所以,常用甘油和0.5mol/lpH9.0~9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。
?。ㄎ澹╃R油一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,使用特制的無(wú)熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。